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如何选择合适的酶标仪
点击次数:598 发布时间:2018-09-25
       酶标仪已经逐渐成为了实验室里的常规仪器,酶标仪一般分为普通酶标仪和多功能酶标仪,普通酶标仪的功能基本相当于一个分光光度计,主要用于吸收光(OD值)检测,我们一般用普通酶标仪进行蛋白/核酸定量、Elisa、MTT等常规实验。而多功能酶标仪在此基础上还可以进行发光检测和荧光检测,能够直观反映出目标分子在细胞内的活性。
  在选购酶标仪的时候,我们会首先面临一个选择,滤光片还是光栅?酶标仪主要分为滤光片型和光栅型,分别以两种不同方式生成特定波长的激发光,一种是通过滤光片,一种是通过单色器(包括光栅和棱镜)。对于我们使用者来说,这两种酶标仪究竟有何区别呢?
  滤光片透光度高,光路简单,能够较大程度减少光线的损失,因此滤光片型酶标仪一般要比光栅型酶标仪灵敏。此外,滤光片能够实现快速的波长转换,很适合离子通道比率分析以及双信号快速动力学分析等。滤光片的配置决定了酶标仪所能使用的波长,我们更改实验波长就是在切换滤光片。滤光片型酶标仪一般要比光栅型便宜一些,如果我们需要的波长比较固定,对灵敏度又有较高要求,那么滤光片型酶标仪无疑是好选择。若是日后想要应用其他波长,还需另外购买滤光片,要是需添置的波长多就不大合算了。所以在我们出手之前一定要先想好未来可能进行的各项研究,谋定而后动。
  目前市面上的光栅型酶标仪其实比滤光片型更为普遍,这是因为光栅可以灵活设置波长,就算临时开展新研究也不用专门去买滤光片。而且如果我们要用未知染料进行检测,或是需要自定义波长和光谱扫描,就只能选光栅型酶标仪。此外,光栅在近紫外区的检测效率也更高(如色氨酸荧光检测)。总的来说,如果实验室应用很多需要多种波长,那么选择灵活方便的光栅型酶标仪准没错。若是应用比较单一但对灵敏度要求高,物美价廉的滤光片型酶标仪就相当贴心。此外,还有BioTek公司的Hybrid Technology系统,该系统将滤光片和单色器组合起来,想用滤光片时选滤光片,想用光栅时选光栅,就是这么简单。
  不仅如此,不论我们买什么,适合自己的才是好的,选择酶标仪时也是如此。酶标仪性能指标包括测定波长范围、滤光片配置、检测速度、吸光度范围、线性范围、分辨率、准确度、精密度等。
  对于一般生命科学实验室来说,酶标仪主要可用于基因表达、信号传导、ELISA、蛋白和核酸定量、细胞活性分析和免疫分析。如果要进行细胞学实验,酶标仪一般要能够底部读取、微孔板扫描、并支持孵育和摇晃。而要做高通量筛选的实验室,就需要考虑到检测速度和灵敏度。高通量筛选可能涉及到特殊筛选溶液、更低的检测限以及大量微孔板。在选择酶标仪时除了要关注可靠性、灵敏度和一致性以外,能否对微孔板所有孔进行同时检测也是不可忽视的考量因素。
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