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鲑鱼ELISA试剂盒检测未知抗原的方法

更新时间:2019-04-28      点击次数:1316
       鲑鱼ELISA试剂盒常用于检测ELISA法定量测定血清、血浆或其它相关生物液体中的含量,那么如何使用鲑鱼ELISA试剂盒检测未知抗原,常用的方法有双抗体夹心法,下面我们来仔细说说。
1. 包被:用0.05M PH9,碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml,在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过一晚上。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml,37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
     以上就是鲑鱼ELISA试剂盒检测未知抗原的双抗体夹心法,希望对大家的检测有所帮助。

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