ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。然而，影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。
1.洗板
①保证洗液注满各孔，洗板针疏通，洗完板后在吸水纸（选择洁净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；
②合理安排，或多用几台洗板机。
2.读板
应保证酶标板清洁，在整个操作过程中保证酶标板不触摸次氯酸；尽可能完结ELISA检测标准自动化，有用前进检测质量。
3.加样
①标本为血清：将血液先天然寄存1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：有必要运用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后有必要当即倒置采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。
②加样后及时放入孵箱。
③加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
④如果选用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。
⑤标本较多时，请分批操作。
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