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灭菌器使用和效果判断

更新时间:2015-07-23      点击次数:1798

       灭菌器如何使用:首先在外层锅内加适量的水,将需要灭菌的物品放入内层锅,盖好锅盖并对称地扭紧螺旋。然后加热使锅内产生蒸气,当压力表指针达到 33.78kPa时,打开排气阀,将冷空气排出,此时压力表指针下降,当指针下降至零时,即将排气阀关好。zui后继续加热,锅内蒸气增加,压力表指针又上升,当锅内压力增加到所需压力时,将火力减小,按所灭菌物品的特点,使蒸气压力维持所需压力一定时间,然后将灭菌器断电或断火,让其自然冷后再慢慢打开排气阀以排除余气,然后才能开盖取物 。

        灭菌器林林总总,质量参差不齐。国内售卖的灭菌器,往往仪器指针达到所需的温度,但灭菌物品的实际温度却未达到要求。导致灭菌物品不*,影响实验结果。尤其是对无菌试验培养基灭菌不*,直接关系到对药品无菌试验结果的判断。使物品在灭菌后达到无菌要求,这是药品实验中的一个基本保证,也是灭菌器效果是否合格是实验成败的zui基础zui关键的首要步骤。现在我们就为您介绍简易的灭菌效果验证的方法。
      1.试验材料
      ① 嗜热芽孢杆菌纸片;噬热芽孢杆菌ATCC7053,含芽孢量5—105CFU/片
      ② 121℃压力蒸汽灭菌化学指示卡;溴甲酚紫胨水培养基,116℃20分钟高压灭菌后备用。
      ③ 0—150℃留点温度计
      2.方法与结果
      将嗜热芽孢杆菌纸片用无菌镊子放人密封试管中。化学指示卡和留点温度计放人敞口的试管中。上两种试管各准备5—10份。分别放置在灭菌器蒸汽口处、底部排气口处及底部水口处或上下左右中间5处。如压力蒸汽灭菌器为二层,则需放10处。留点温度计标化合格后可用于验证试验。检测前,需将温度计的水银柱甩至40℃以下。每次监测后留点温度计的温差应在1℃之间,则说明灭菌器内的温度分布是均匀的。灭菌后的菌片应在严格无菌操作条件下放人灭菌后的溴甲酚紫胨水培养基内。56—60℃培养24-48小时,观察颜色变化。如培养基变为黄色,说明菌片中的嗜热芽孢杆菌尚未*灭活,细菌仍可在培养基中生长,分解葡萄糖产酸变为黄色。如培养基颜色不变化仍为紫色,则说明芽孢菌已灭活。同时要用未经灭菌的纸片放人培养基内作为阳性对照,不加纸片的空白培养基作为阴性对照。化学指示卡上的指示色块,在灭菌器灭菌时,由淡黄色变为黑色。随着颜色变化的深浅,并与对照色相比,可判断灭菌效果是否达到要求。化学指示卡应在干燥处保存。遇潮会变色,影响灭菌效果的观测。灭菌器必须使蒸汽顺利进入灭菌器内,与灭菌物品接触,并将原有的冷空气排出方可达到灭菌的效果。要进行空载热分布和满载热穿透力验证(满载时不超过总体积的2/3)。二种验证各重复三次,共做六次表。5个点六次试验表明温度均在121 ℃,化学指示卡变黑;程度与对照色一致;培养基均未改变颜色,说明灭菌器效果合格。

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