酶标仪是一种精密的光学仪器，因此良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性，还能够延长其使用寿命。根据DINVDE0871条例，仪器应放置在无磁场和干扰电压的位置。依据DIN45635－19条例： 仪器应放置在低于40分贝的环境下。 为延缓光学部件的老化，应避免阳光直射。 操作时环境温度应在15℃－40℃之间，环境湿度在15％－85％之间。 操作电压应保持稳定。 操作环境空气清洁，避免水汽，烟尘。 保持干燥、干净、水平的工作台面，以及足够的操作空间。
酶标仪用于检测钙离子通路主要通过两种方式：1，荧光法。化合物与细胞膜上离子通道结合后，改变离子通道状态，通道打开，钙离子进入细胞。进入细胞后与细胞内钙离子荧光指示剂结合，发出荧光后酶标仪捕获，荧光强度与进入细胞的钙离子含量成正比。荧光指示剂多用FLuo3，Fluo3-AM是一种可以乙酰甲酯衍生物，可以穿透细胞膜进入细胞，进入细胞后被细胞内的酯酶剪切成FLuo3并滞留在细胞内，钙离子进入细胞后与之结合，会发出较强的荧光。2，发光法。水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当钙离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内钙离子水平。与常规的荧光钙离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点，1）能检测较大范围的钙浓度 – 从0.1 μM至 >100μM；2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光钙离子指示剂；虽然信号比使用荧光钙离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的钙离子监测。
欢迎来到