补体C3 ELISA 试剂盒

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补体C3 ELISA 试剂盒

注意事项

1.   从2-8℃取出的试剂盒，在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2.   各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差

3.   建议所有标准品、样本都做双份检测。

4.   严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

5.   为避免交叉污染，要避免重复使用手中的吸头和封板膜。

6.   不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

7.   底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。

补体C3 ELISA 试剂盒

用于标记抗体或抗抗体的酶须具有下列特性：有高度的活性和敏感性；在室温下稳定；反应产物易于显现；能商品化生产。当前应用较多的有辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以HRP应用广。 

过氧化物酶

过氧化物酶广泛分布于植物中，辣根中含量高，从辣根中提取的称辣根过氧化物酶（HRP），是由无色酶蛋白和深棕色的铁卟啉构成的一种糖蛋白（含糖量18%），分子量约40 000，约由300个氨基酸组成，等电点为pH 3-9，催化反应的适pH值因供氢体不同而稍有差异，一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%饱和度以下的硫酸铵溶液。酶蛋白和辅基的大吸收光谱分别为275nm和403nm。

酶的纯度以RZ表示：RZ=OD403/OD275

纯酶的RZ多在3.0以上，高为3.4。RZ在0.6以下的酶制品为粗酶，非酶蛋白约占 75%，不能用于标记。RZ在2.5以上者方可用于标记。HRP的作用底物为过氧化氢，催化反应时的供氢体有几种：（1）邻苯二胺（OPD），产物为橙色，可溶性，敏感性高，大吸收值在490nm，可用肉眼观察判别，容易被浓H2SO4终止反应，颜色可在数小时内不改变,是目前国内ELISA中常用的一种；（2）联大茴香胺（OD）,产物为橘黄色，大吸收值在400nm，颜色较稳定；（3）5－氨基水杨酸（5－AS）：产物为深棕色，大吸收值在449nm，部分溶解，敏感性较差；（4）邻联甲苯胺（OT）产物为蓝色，大吸收值在630nm，部分溶解，不稳定，不耐酸，但反应快，颜色明显。