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胰弹力蛋白酶(胰肽酶E)ELISA 试剂盒
间接法常用于检测抗体,一般的操作步骤为:
将已知的抗原固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余的抗原。
加入待测检体,检体中若含有待测的一次抗体,则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。
洗去多余待测检体,加入带有酶的二次抗体,与待测的一次抗体键结。
洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酶呈色,藉仪器(ELISA reader)测定塑胶盘中的吸光值(OD值),以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。
胰弹力蛋白酶(胰肽酶E)ELISA 试剂盒
血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在,后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗体多用捕获法,先将所有血清IgM(包括异性IgM和非特异性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再测定特异性IgM。操作步骤如下:
⑴将抗人IgM抗体连接在固相载体上,形成固相抗人IgM。洗涤。
⑵加入稀释的血清标本:保温反应后血清中的IgM抗体被固相抗体捕获。洗涤除去其他免疫球蛋白和血清中的杂质成分。
⑶加入特异性抗原试剂:它只与固相上的特异性IgM结合。洗涤。
⑷加入针对特异性的酶标抗体:使之与结合在固相上的抗原反应结合。洗涤。
⑸加底物显色:如有颜色显示,则表示血清标本中的特异性IgM抗体存在,是为阳性反应。
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