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ELISA试剂盒的测定结果和标准相差太大怎么办?
点击次数:668 发布时间:2019-05-28
      ELISA试剂盒测定值与文献中相差太大怎么办,下面看看我们来仔细说说:
  (1)生化测定主要目的是比较处理内和处理间该指标的变化。同时,要测定值,往往是很可能甚至不可能的。因此,追求的不是值而是相对值。
  (2)用不同测定方法和不同测定条件下得到的测定值可能存在很大差异。因此,如果测定方法不同,同一样品的测定值通常是不可以直接比较的。这也是建议使用试剂盒测定的理由之一。因为不同作者用同一试剂盒测定的数据才是可以相互比较的。
  (3)同一种材料,不同处理、不同发育状态和不同器官其生化指标可能发生很大变化。因此,能够直接用来比较的文献资料本来就不多。
  (4)当然,话说回来,测定值如果与文献报道相差太大,首先应该检查单位是否一致,包括摩尔还是毫摩尔,是干重、鲜重还是蛋白质浓度,是分钟还是秒,等等。其次,检查计算是否有误?较后,如果相差不是数量级,通常是很正常的。
  ELISA试剂盒实验结果的处理也是尤为重要的,今日,下面为大家分享ELISA试剂盒实验结果的小建议:
  1.ELISA实验中样品都要做复孔或三孔,然后计算每个浓度标准品的平均OD值,复孔的变异系数应该小于20%。
  2.平均OD值减去空白孔的OD值。
  3.制作标准曲线。以减去本底后的OD值为X轴,标准品的浓度为Y轴,利用作图软件得出一个合适的计算方法。建议使用合适的软件来作图,比如CurveExpert 1.4。这款软件能够给出很多种方法(比如直线、半对数、对数、四参数方程等)并从中选择一条较合适的方程。要想检验某条曲线是否与表中数据吻合,可以将标准品的浓度作为未知数,将对应的OD值带入该方程,计算出标准品的浓度,得到的结果应该与实际浓度很接近(+/-10%)。选择拟合度较高的那条曲线。
 
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