基因扩增仪通过精确控制温度,实现DNA的快速、特异性和高敏感性扩增。PCR反应体系包括DNA模板、引物、dNTPs(dATP、dTTP、dCTP、dGTP)和热稳定DNA聚合酶(如Taq酶)。在PCR过程中,仪器内部通常采用加热块或加热芯来保持温度恒定,并使用温度传感器进行精确测温。反应过程包括变性、退火和延伸三个基本步骤,通过循环控制温度,使DNA模板和引物在变性、退火和延伸阶段都能得到最佳的温度条件。
基因扩增仪在科研和临床中具有广泛的应用,包括但不限于:
基因扩增:用于扩增特定的DNA片段,使研究人员能够快速地检测和分析基因序列。
定性PCR基因扩增:用于确定样品中是否存在特定的DNA序列。
荧光/酶免终点定量DNA基因扩增:用于定量检测样品中的DNA含量。
基因芯片等其他基因分析应用:为基因芯片等高通量基因分析技术提供扩增支持。
基因扩增仪可以根据不同的分类标准进行分类,常见的分类方式包括:
根据功能分类:
普通PCR仪:用于简单的DNA扩增。
实时荧光定量PCR仪:在扩增过程中实时监测荧光信号,用于定量检测DNA含量。
梯度PCR仪:可以设置一系列不同的退火温度,用于优化PCR反应条件。
原位PCR仪:在细胞内实现基因扩增,用于细胞定位和基因表达研究。
根据加热模式分类:
立体膜加热技术:采用立体膜加热方式,加热均匀且效率高。
其他加热技术:如加热块或加热芯等,根据具体仪器设计而定。