实时定量PCR仪通过荧光化学物质(如荧光染料或荧光探针)标记DNA产物,在PCR指数扩增期实时捕获荧光信号强度变化。系统自动采集每个循环的荧光增量数据,经配套软件进行基线校正和阈值设定后,利用标准曲线或ΔΔCt法计算初始模板浓度。这一技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,且整个PCR过程可实现自动化,耗时短,操作方便,不易污染。
实时定量PCR仪选型建议:
在选择实时定量PCR仪时,需综合考虑以下因素:
实验需求:明确待检测的靶标分子类型、检测灵敏度要求及平台适用范围。例如,基因表达分析可选择4通道系统,而病毒载量检测则建议选配ROX校正染料通道。
性能指标:关注温控系统的精度、灵敏度、扩增速度及均匀性。性能越好的PCR仪,实验稳定性和准确性越高。
品牌和售后服务:选择品牌的产品,确保产品质量和售后服务可靠。同时,考虑品牌产品的应用范围和配件选择。
预算:根据预算选择适合的仪器。在预算有限的情况下,可选择性能稳定、性价比较高的PCR仪。