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浅说实时荧光定量PCR仪的关键的作用

更新时间:2013-07-08      点击次数:2002
    在90年代早期,就已经发现实时荧光定量PCR仪,但是当时的技术比较落后,给后来的PCR仪起到了的两个关键的作用是:
1、实时荧光定量PCR仪的核酸外切酶活性的发现,能降解特异性荧光记探针,因此使得间接的检测PCR产物成为可能。
2、实时荧光定量PCR仪使在一密闭的反应管中能实时地监测反应全过程。这两个发现的结合以及相应的仪器和试剂的商品化发展的导致在研究工作中的运用。
  现在,PCR仪随着反应循环数的增加,zui终PCR反应不再以指数方式生成模板,从而进入平台期。因此可以在PCR反应处于指数期的某一点 上来检测PCR产物的量,并且由此来推断模板zui初的含量。每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数。研究表明,每个模板的域值循环数值与该模板的起始拷贝数的 对数存在线性关系,起始拷贝数越多,域值循环数值越小。

 

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