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酪氨酸羟化酶(TH)ELISA 试剂盒
间接法常用于检测抗体,一般的操作步骤为:
将已知的抗原固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余的抗原。
加入待测检体,检体中若含有待测的一次抗体,则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。
洗去多余待测检体,加入带有酶的二次抗体,与待测的一次抗体键结。
洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酶呈色,藉仪器(ELISA reader)测定塑胶盘中的吸光值(OD值),以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。
在临床检验中一般采用商品试剂盒进行测定。ELISA中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物等。完整的ELISA试剂盒包含以下各组分:
工作原理
酪氨酸羟化酶(TH)ELISA 试剂盒
本试剂盒采用双位点夹心酶联免疫吸附法(ELISA),测定样品中的水平。向预先包被抗体的酶标孔中加入标准品、待测样本和HRP标记的抗体,经过温育和洗涤,去除未结合的组分,然后再加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅与样品中的浓度呈正相关。
⑴已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
⑵酶标记的抗原或抗体(结合物);
⑶酶的底物;
⑷阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
⑸酶联物(结合物)及标本的稀释液;
⑹洗涤液;
⑺酶反应终止液。
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