神经肽Y（NPY）ELISA 试剂盒

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神经肽Y（NPY）ELISA 试剂盒

捕获法

血清中针对某些抗原的特异性IgM常和特异性IgG同时存在，后者会干扰IgM抗体的测定。因此测定IgM抗体多用捕获法，先将所有血清IgM（包括异性IgM和非特异性IgM）固定在固相上，在去除IgG后再测定特异性IgM。操作步骤如下：

⑴将抗人IgM抗体连接在固相载体上，形成固相抗人IgM。洗涤。

⑵加入稀释的血清标本：保温反应后血清中的IgM抗体被固相抗体捕获。洗涤除去其他免疫球蛋白和血清中的杂质成分。

⑶加入特异性抗原试剂：它只与固相上的特异性IgM结合。洗涤。

⑷加入针对特异性的酶标抗体：使之与结合在固相上的抗原反应结合。洗涤。

⑸加底物显色：如有颜色显示，则表示血清标本中的特异性IgM抗体存在，是为阳性反应。

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亲和素是一种糖蛋白，一分子亲和素可以与四个生物素小分子发生专一亲和作用，类似抗原与抗体亲和。它们之间的作用力是目前已知强的非共价作用。80年代后，随着生物素-亲合素系统（BAS）作用被发现，这一亲和作用被结合应用到ELISA技术上，大大提高了后者反应的灵敏性与专一性。生物素很易与蛋白质（如抗体等）以共价键结合。这样，结合了酶的亲和素分子与结合有特异性抗体的生物素分子产生反应，既起到了多级放大作用，又由于酶在遇到相应底物时的催化作用而呈色，达到检测未知抗原（或抗体）分子的目的。